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血細胞分析儀是臨床檢驗最常用的儀器之一。血細胞分析儀的應用,不但提高了工作效率和質(zhì)量,而且為臨床提供了更多具有臨床價(jià)值的參數,對疾病的診斷治療有著(zhù)重要的意義?,F在廣泛應用臨床的電阻抗法血細胞分析儀在細胞檢測的過(guò)程中仍存在某些局限性,在實(shí)際工作中常常會(huì )受到一些異常因素的干擾。在此主要討論血細胞分析過(guò)程中標本自身的干擾因素及糾正措施,以確保我們檢測結果的準確、可靠。常見(jiàn)的干擾因素如下。
1.受干擾常見(jiàn)因素
1.1冷凝標本:冷凝集素病是免疫球蛋白M(IgM)抗體引起的自身免疫病。其特點(diǎn)是在較低的溫度下,某些疾病患者自身的紅細胞與這種抗體發(fā)生凝集。血液冷凝集對紅細胞計數及其各項參數的檢測都能造成很大影響。研究表明,冷凝集素可以導致WBC、MCV假性增高,RBC、HCT、PLT假性減低,特別是RBC、HCT降低尤為顯著(zhù),但RBC、HB、HCT 3個(gè)參數結果之間的關(guān)系明顯不符,并由此造成MCH、MCHC等計算結果異常增高[1]。糾正措施:將標本放入37℃水浴箱30min ,立即上機檢測,各個(gè)參數基本恢復正常。
1.2脂血標本:脂血是最常見(jiàn)的干擾因素。由于血紅蛋白檢測原理是比色法,引起血清濁度增大的因素(如高脂血癥、異常血漿蛋白質(zhì)、WBC>50*109/L等)都可導致其假性增高,進(jìn)而引起MCH、MCHC顯著(zhù)增加。處理方法:緩慢離心,吸取血漿加入等量的稀釋液。
1.3免疫球蛋白的干擾:巨球蛋白血癥和多發(fā)性骨髓瘤時(shí)血漿中IgM 增高,高濃度的免疫球蛋白干擾了溶血劑的作用,引起MCHC假性增高。解決辦法:稀釋樣本或吸取血漿加入等量的稀釋液。
1.4溶血標本:正常血清中游離血漿血紅蛋白正常參考范圍為:10-40mg/L,與紅細胞內的血紅蛋白一起檢測時(shí),不會(huì )引起紅細胞內的血紅蛋白增高。但在病理情況下,某些傷害(如毒蛇咬傷后)誘發(fā)的彌漫性血管內凝血(DIC)、藥物、輸血或采血不順利等因素可引起標本溶血,血漿游離血紅蛋白增加,可使MCHC假性增高,RBC明顯減少。糾正措施:觀(guān)察血涂片是否有較多RBC碎片,或與臨床聯(lián)系,重新采集標本。
2.WBC常受的干擾因素
2.1有核RBC:由于正常情況下RBC的數量約是WBC的1000倍,會(huì )引起白細胞總數和淋巴細胞總數及其比例顯著(zhù)假性增高[2]。特別在某些疾病如溶血性貧血時(shí),外周血中可出現大量有核RBC,它不能被稀釋液破壞,而使WBC計數偏高。部分五分類(lèi)血細胞分析儀會(huì )提示有核RBC存在,部分五分類(lèi)儀器(邁瑞BC-6800/6900等)也會(huì )計數有核RBC并自動(dòng)校正而直接給出準確的WBC計數結果[3]。糾正措施:手工分類(lèi)計數100個(gè)WBC遇到的有核RBC數,依據WBC校正公式進(jìn)行計算
2.2巨大PLT標本:某些血液系統疾病患者血液中可能出現與WBC大小相同的巨大PLT,這些巨大PLT被當作WBC計數,使WBC假性增高。糾正措施:用手工方法對WBC進(jìn)行計數。
2.3難溶血或溶血不良標本:嚴重肝病患者由于RBC膜抗溶性增強。糾正方法:采用手工方法計數WBC;用某些不受干擾的儀器檢測,排除干擾。
2.4高濃度膽紅素:高濃度膽紅素影響WBC的計數和分群。在游離膽紅素為192.1μmol/L時(shí),對WBC的計數和分群影響很小,256.1μmol/L時(shí)影響顯著(zhù),384.1μmol/L時(shí)對WBC的計數影響顯著(zhù),儀器無(wú)法分群[4]。糾正方法:采用手工方法計數WBC。
3.PLT常受的干擾因素
3.1小細胞性貧血標本:缺鐵性貧血、地中海貧血等患者的小細胞對某些儀器PLT的計數有明顯干擾。一般電阻抗法血液分析儀將30-36fL的顆?;虻?0fl(部分光學(xué)法儀器)的顆粒設置為PLT。電阻抗法血細胞分析儀,僅能識別顆粒大小,不能區分顆粒性質(zhì)。當MCV<70fl時(shí),血細胞分析儀的PLT計數容易受小細胞的干擾而假性增高。一些高檔血細胞分析儀可以抗小紅細胞的干擾。主要是這些儀器采用了光學(xué)法的流式細胞學(xué)計數原理檢測PLT糾正措施:用微鏡重新計數PLT或者采用光學(xué)法流式血細胞分析儀檢測血小板。
3.2 PLT聚集:①采血不順利時(shí)引起血小板破壞和聚集,可使血小板計數假性降低。措施:重新采集血液或者手工方法計數PLT。②EDTA-K2抗凝,PLT形態(tài)逐漸變?yōu)榍蛐?,體積增大,且可引起PLT聚集。造成血分析儀不能辨認,引起PLT假性減少。措施:用不含EDTA抗凝劑稀釋液立即稀釋標本或顯微鏡重新計數PLT,同時(shí)要觀(guān)察血涂片是否有PLT集聚。
3.3PLT衛星現象:由EDTA抗凝劑誘導引起的PLT圍繞在中性粒細胞或淋巴細胞/淋巴瘤細胞周?chē)?,形成衛星現象。一般引起PLT中度減少??朔k法:立即稀釋標本檢測。
3.4細胞碎片:血細胞分析儀不能完全將PLT與其他類(lèi)似大小物質(zhì),如紅細胞碎片或白細胞碎片、灰塵等區別,引起PLT假性增高。糾正方法:用顯微鏡手工計數PLT。
4.其他
微生物包括細菌、真菌、瘧原蟲(chóng)等也會(huì )干擾WBC、PLT檢測。
綜上所述,由于某些疾病的原因,造成血液標本性質(zhì)的改變。血液分析儀在血細胞檢測的過(guò)程中,常受標本自身的干擾因素是不可忽視的。這就要求檢驗人員要從中找到正確的解決辦法,力求結果準確,為臨床提供一個(gè)可靠的診斷依據。
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