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血細胞分析儀檢驗圖形:根據檢測原理不同,分為直方圖和散射圖兩種細胞分布圖形。
【第一部分】血細胞直方圖(Histogram)
希森美康/邁瑞血細胞分析儀常規檢測紅細胞/血小板的技術(shù)為電阻抗原理,又稱(chēng)庫爾特原理):
如上圖所示,懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細胞相對于電解質(zhì)溶液是非導電的顆粒,當體積不同的血細胞(或類(lèi)似顆粒)通過(guò)計數小孔時(shí),可引起小孔內外電流或電壓的變化,形成與血細胞數量相當、體積大小相應的脈沖電壓,從而間接區分出血細胞群,并分別進(jìn)行計數。
血細胞直方圖,其橫坐標為血細胞體積大小,縱坐標為不同體積細胞的相對頻率,是表示細胞群體分布情況的統計圖形。它可以顯示出某一特定細胞群的平均細胞容積、細胞分布情況及有無(wú)明顯異常細胞群的存在。
直方圖觀(guān)察的內容:
①峰的位置,反映主細胞群的位置有無(wú)異常。
②峰的高低,大致反映主細胞群數量的多少。
③峰底的寬度,反映細胞群容積大小的不均一性或離散程度大小,如RDW、PDW等。
④有無(wú)異常峰出現,和正常直方圖相比有異常峰出現,多提示血液中有異常細胞群或干擾因素存在。
⑤峰的起始處或結尾處有無(wú)異常,若有多提示有干擾因素。
(一)紅細胞直方圖
正常紅細胞直方圖是一條近似正態(tài)分布的單峰曲線(xiàn),通常位于36~360 fl 范圍內,橫坐標表示RBC體積,縱坐標表示不同體積紅細胞出現的頻率。
正常紅細胞集中在50~200 fl 范圍內,可見(jiàn)兩個(gè)細胞群體:一個(gè)是紅細胞主群,從50~125 fl ,為一個(gè)兩側基本對稱(chēng)、較狹窄,呈現倒扣鐘狀的正態(tài)分布曲線(xiàn);另一群是大細胞群,位于主群右側不與X軸重合拖尾部分,分布在125 fl ~200 fl 區域,又稱(chēng)“足趾部”,是一些大紅細胞、網(wǎng)織紅細胞、紅細胞的二聚體、多聚體及白細胞的混合物。
異常紅細胞直方圖(圖2-11):
以小編的工作經(jīng)驗,上圖中給出的巨幼細胞性貧血的紅細胞直方圖,曲線(xiàn)頂點(diǎn)低的太夸張了;
下圖為小編在工作中遇到的一例明確診斷為巨幼貧的紅細胞直方圖:
另外,特別典型的紅細胞雙峰(明顯有兩個(gè)峰頂,如下圖),
還可見(jiàn)于缺鐵性貧血治療有效(補鐵)、巨幼細胞性貧血治療有效(補維生素B12和/或葉酸)、輸血后等。
(二)血小板直方圖
正常血小板直方圖是一個(gè)偏態(tài)分布的單峰光滑曲線(xiàn),通常在2~30fl范圍內,主要集中在2~15fl。
當血標本中存在大血小板、血小板聚集、小紅細胞、紅細胞碎片時(shí),可出現異常血小板直方圖(如圖2-12)。
【第二部分】血細胞散點(diǎn)圖
希森美康/邁瑞血細胞分析儀的白細胞分群原理:
溶血劑使白細胞的細胞膜輕微受損,此時(shí)可利用熒光染料對各類(lèi)白細胞進(jìn)行染色,再運用“鞘流”“掃流”技術(shù),使混懸在樣品中的白細胞單個(gè)成束排列通過(guò)激光檢測器,對白細胞的參數進(jìn)行分析,獲取前向散射光(反映細胞大?。?、側向散射光(反映細胞內部結構)和側向熒光(反映細胞內核酸/細胞器的種類(lèi)與多少)三種信號,根據這三種參數區分各類(lèi)白細胞。
總之,希森美康/邁瑞五分群血細胞分析儀在測定血細胞參數的同時(shí),還可打出直觀(guān)白細胞分類(lèi)彩色的散射圖,也稱(chēng)散點(diǎn)圖。
散點(diǎn)圖觀(guān)察的內容:
①在分析圖形時(shí)應注意與正常圖形比較,結合細胞參數、報警提示綜合分析。
②注意觀(guān)察散射圖各個(gè)細胞群區域的大小、密度、顏色深淺。特別要注意除正常細胞群以外區域有無(wú)細胞群出現。
一、白細胞散點(diǎn)圖
(一)4 DIFF(四分群)通道散點(diǎn)圖
利用半導體激光流式細胞術(shù)、核酸熒光染色技術(shù),采用溶血劑完全溶解紅細胞和血小板,白細胞膜僅部分溶解。聚亞甲基藍核酸熒光染料進(jìn)入白細胞內,使DNA、RNA和細胞器著(zhù)色。因為熒光強度與細胞內核酸含量成比例,所以未成熟粒細胞、異常細胞熒光染色深,成熟白細胞熒光染色淺,從而得到4DIFF(四分群)白細胞散點(diǎn)圖(如下)。
最新的XN系列中,與該通道對應的是WDF通道,散點(diǎn)的分布基本一致,不同之處在于:
XN系列的溶血素試劑溶血能力更弱,在單核細胞膜上打的孔小于XE/XT系列,使單核細胞內容物復雜程度增加,同時(shí)增加傾斜度,能更好的區分淋巴細胞和單核細胞。
邁瑞BC-6000/6000plus系列也有與之類(lèi)似的通道。
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(二)WBC/BASO通道散點(diǎn)圖
在堿性溶血劑作用下,除嗜堿性粒細胞外的其他所有細胞均被溶解或萎縮,經(jīng)流式細胞術(shù)計數,可得到WBC/BASO百分率和絕對值及WBC/BASO散點(diǎn)圖(如下)。
最新的XN系列無(wú)此通道,而邁瑞BC-6000系列有與之類(lèi)似的通道。
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(三)未成熟髓細胞信息通道(IMI)散點(diǎn)圖
采用射頻、電阻抗和特殊試劑結合法。在細胞懸液中加硫化氨基酸,幼稚細胞膜脂質(zhì)含量高,結合硫化氨基酸的量多于較成熟的細胞,對溶血劑有抵抗作用。加入溶血劑后,成熟細胞被溶解,只留下幼稚細胞和異型/異常淋巴細胞(如下圖),報告百分率和絕對值,并提示核左移。
希森美康最新的XN系列無(wú)此通道。
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(四)散點(diǎn)圖解讀
注意上圖中的D部分,希森美康老系列儀器和邁瑞BC-6000系列儀器都有專(zhuān)門(mén)的有核紅細胞通道,散點(diǎn)圖分布也類(lèi)似。但該通道需要配備專(zhuān)門(mén)的有核紅細胞試劑,故限制了其應用。
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