隨著(zhù)基礎醫學(xué)、醫療科技的不斷發(fā)展，血液分析儀的檢測原理也日益精準化、多樣化，檢測技術(shù)不斷創(chuàng )新，檢測參數顯著(zhù)增多?！熬雀?、速度快、易操作、功能強”是現代血液分析儀的強勁優(yōu)勢?？v觀(guān)市面上不同廠(chǎng)商的血液分析儀，采用“核酸熒光染色”檢測原理的血液分析儀是眾多血球品牌中的主流與典范。

　　案例：患者，女性，28歲。因咽旁間隙感染到某基層醫院就診(使用三分群血液分析儀)。

　　血常規檢測結果如下(圖一)：

　　血常規檢測結果顯示，WBC，12.8*109/L結果偏高，提示可能存在感染或炎癥;RBC、HGB結果輕度偏低，提示可能存在輕度貧血。臨床醫生基于此次血常規檢測結果，診斷為普通的細菌性感染，囑患者口服抗生素阿莫西林5天。一周后，患者癥狀仍沒(méi)有好轉，遂再次去另一家某醫院就診(使用某五分類(lèi)核酸染色檢測原理的血液分析儀)檢測結果如下：

　　儀器提示：WBC 17.07*109/L,IG 0.3%.報警提示“白細胞異常散點(diǎn)圖”，“原始細胞?”，“核左移?”，HGB 108g/L,提示輕度貧血。

　　圖形分析，在DIFF散點(diǎn)圖上(箭頭所指)上白細胞分類(lèi)不良，見(jiàn)下圖：

　　血涂片檢查：在血涂片上發(fā)現大量早幼粒細胞，并可見(jiàn)“柴捆”狀Auer小體(箭頭所指)。

　　最終，該患者確認為：急性早幼粒白血病(M3)。

　　該病例的思考：

　　該病例為典型的白血病漏檢病例，患者首次在三分群儀器上檢測，未發(fā)現幼稚細胞，第二次在五分類(lèi)儀器上檢測，通過(guò)儀器的異常報警提示以及散點(diǎn)圖形態(tài)異常的提示，并結合鏡檢結果，最終診斷為白血病。避免了白血病的早期漏檢，為患者早期診斷、早期治療贏(yíng)得了寶貴的時(shí)間和機會(huì )，同時(shí)，也規避了檢驗科自身的質(zhì)量風(fēng)險。

　　為何在三分群儀器上檢測會(huì )存在漏檢的風(fēng)險，而在五分類(lèi)血球儀上可規避異常細胞的漏檢，采用核酸熒光染色原理血液分析儀的技術(shù)優(yōu)勢是什么?

　　三分群血液分析儀的檢測原理為電阻抗法，是根據細胞電阻性對細胞進(jìn)行計數，利用細胞的體積大小不同引起電阻信號大小差異，來(lái)對白細胞進(jìn)行分群和區分紅細胞和血小板，其獲取細胞的檢測信號單一，存在以下方面的檢測局限：

　　方法學(xué)單一，非特異性檢測

　　(1)僅分大小，不辨其他特性，相同大小的顆粒易誤計數。

　　(2)中間細胞包含了多種細胞，和成熟WBC分類(lèi)有很大差異。

　　干擾大，準確性差

　　(1)RBC對PLT的干擾

　　(2)RBC對WBC的干擾

　　(3)PLT對RBC的干擾

　　(4)PLT對WBC的干擾

　　(5)WBC對RBC的干擾

　　(6)WBC對HGB的干擾

　　(7)異常顆?；蛐盘柕母蓴_

　　報警提示的信息少，難以分辨處理

　　(1)MID增多:可能是MONO、EOS、BASO、VAR-LYM、BLAST增多

　　(2)LYM干擾：PLT、NRBC、FWBC、NWBC

　　(3)PLT干擾：RBC、PLT本身、WBC、FWBC……

　　因此，三分群血液分析儀的檢測結果可信度不高，當全部推片復檢時(shí)，其工作量太大無(wú)法執行。

　　采用核酸熒光染色的五分類(lèi)血液分析儀檢測原理及優(yōu)勢：

　　檢測原理：

　　五分類(lèi)血液分析儀采用特異性的核酸熒光染料，細胞經(jīng)過(guò)特殊溶血素的處理后，熒光染料可以快速進(jìn)入胞漿和胞核對核酸染色，細胞內的熒光染料在特定波長(cháng)的激光激發(fā)下產(chǎn)生一定的熒光強度，這種熒光強度與細胞的核酸含量成正相關(guān)。

　　熒光染色后，熒光強度大小依次排列順序為：異型淋巴細胞 > 原始細胞/幼稚粒細胞 > 單核細胞 > 淋巴細胞 > 粒細胞/晚幼紅細胞 > 網(wǎng)織紅細胞/網(wǎng)織血小板/聚集血小板 > 成熟紅細胞/成熟血小板。

　　待測血樣稀釋成單個(gè)細胞懸液，細胞經(jīng)過(guò)快速特異性核酸熒光染色，在鞘液的約束下，排成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出，通過(guò)測量區的細胞在垂直入射的激光束照射和激發(fā)下，產(chǎn)生前向散射光(FSC)、側向散射光(SSC)、側向熒光(SFL)。FSC主要反映細胞的大小;SSC主要反映細胞內顆粒物質(zhì)的大小和多少;SFL主要反映細胞的核酸含量的多少。

　　檢測優(yōu)勢：

　　(1)細胞識別和分類(lèi)計數的準確率高：采用特異性的核酸熒光染色，對細胞大小、核酸多少、細胞內部復雜結構是作本質(zhì)的鑒別，能準確區分不同種類(lèi)、不同形態(tài)的細胞。如下圖，細胞經(jīng)核酸熒光染色后，呈現了不同的形態(tài)特點(diǎn)和檢測信號，儀器便可準確區分。

　　(2)異常細胞檢出靈敏度高

　　血液分析儀的應用價(jià)值之在于發(fā)現細胞數量異常和異常細胞(如幼稚粒細胞、異型淋巴細胞、原始細胞等)，采用核酸熒光染色技術(shù)的五分類(lèi)儀器，根據異常細胞的核酸含量較高，可以準確定量檢測異常的細胞，避免臨床上的漏檢，為早期發(fā)現惡性疾病和療效判斷提供了重要的臨床信息。

　　(3)提供更多、更重要參數和報警信息

　　只有更多的檢測參數、更準確的報警信息，才能更好地指導檢驗醫生對異常樣本進(jìn)行有針對性的復檢，從而保證異常樣本不被漏檢，做到規避檢驗結果錯誤、臨床醫生漏診、誤診的風(fēng)險。

　　核酸熒光染色技術(shù)除應用于白細胞系參數的檢測外，還應用于紅細胞系參數、血小板系參數的檢測，如：網(wǎng)織紅細胞參數，RET-O、RBC-O、RET-He、LFR、MFR、HFR…等;血小板系參數：PLT-F、IPF…等。其檢測結果的精準度也被廣大的臨床用戶(hù)所認可。因此，采用核酸熒光染色原理的血液分析儀，必定是血液分析儀行業(yè)內的主流與典范。